顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別
顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別
顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別:光圈大小、深度、分辨率、對比度等等,大光圈顯微鏡適用于觀察暗區(qū)域或需要快速對焦的樣品,而小光圈顯微鏡適用于觀察細(xì)節(jié)或需要高分辨率的樣品。
顯微鏡大光圈和小光圈的區(qū)別
1、光圈大小。大光圈相對于小光圈來說,其光圈開口的大小更大,可以讓更多的光線通過樣品并投射到目鏡中,從而增加樣品的亮度和清晰度。
2、深度。大光圈可以產(chǎn)生較淺的焦深度,而小光圈則產(chǎn)生較深的焦深度。這意味著在使用大光圈時,只有少數(shù)區(qū)域處于清晰狀態(tài),而其他區(qū)域則模糊不清;而在使用小光圈時,更多的區(qū)域可以保持清晰。
3、分辨率。使用小光圈時,由于深度增加,樣品的分辨率也會更高。這是因為小光圈能夠減少焦散現(xiàn)象,從而提高分辨率。
4、對比度。使用小光圈可以提高對比度,因為深度增加可以減少光的散射,從而使樣品的細(xì)節(jié)更加清晰。
顯微鏡的使用方法
1.調(diào)節(jié)亮度:由暗調(diào)亮,可以用大光圈,凹面鏡,調(diào)節(jié)反光鏡的角度。
2.將臨時裝片在載物臺上適當(dāng)位置固定好。
3.低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔,使用粗準(zhǔn)焦螺旋將鏡筒自上而下的調(diào)節(jié),眼睛在側(cè)面觀察,避免物鏡鏡頭接觸到玻片而損壞鏡頭和壓破玻片。
4.左眼通過目鏡觀察視野的變化,同時調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩慢上移,直至視野清晰為止。
5.如果在視野中沒有被觀察對象,可以移動裝片,原則為欲上反下,欲左反右。
6.如果不夠清晰,可以用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)一步調(diào)節(jié)。
7.如果需要在高倍物鏡下觀察,可以轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器調(diào)換物鏡。如果視野較暗,可通過1的方法調(diào)節(jié);如果不夠清晰,可通過6的方法調(diào)節(jié),但是不可以用4的方法。
8.使用完畢后,請調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)換器,使空鏡頭孔對著通光孔,使反光鏡豎起來,將鏡筒調(diào)至最低后裝入鏡箱。
顯微鏡的分類
1.普通光學(xué)顯微鏡:普通光學(xué)顯微鏡通常以自然光或燈光為光源,其波長約0.5μm.在最佳條件下,顯微鏡的最大分辨率為波長的一半,即0.25μm,而肉眼所能看到的最小形象為0.2mm,故在普通光學(xué)顯微鏡下用油鏡放大1000倍,可將0.25μm的微粒放大到0.25mm,肉眼便可以看清,一般細(xì)菌大于0.25μm,故用普通光學(xué)顯微鏡均能清楚看到。
2.暗視野顯微鏡:暗視野顯微鏡是用特制的暗視野集光器代替普通光學(xué)顯微鏡上的明視野集光器,由于暗視野集光器的中央為不透光的遮光板,光線不能直接射入鏡筒,故背景視野黑暗無光,而從集光器四周邊緣斜射到標(biāo)本部位的光線,經(jīng)菌體散射后而進(jìn)入物鏡。故在強(qiáng)光的照射下,可以在黑暗的背景中看到發(fā)亮的菌體,猶如夜空中的明亮星星。明暗反差提高了觀察的效果,多用于檢查不染色的活細(xì)菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察。
3.相差顯微鏡:在進(jìn)行未染色標(biāo)本檢查時,由于細(xì)菌的折旋光性與周圍環(huán)境的折旋光性相近,明暗對比不明顯。在普通光學(xué)顯微鏡下不易看清,用暗視野顯微鏡只能看到發(fā)亮的菌體輪廓,看不清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。而相差顯微鏡依據(jù)光波穿過標(biāo)本中密度不同的部位時,引起光相差異的原理,利用相差板的光柵作用,改變直射光的光相和振幅,將光相的差異轉(zhuǎn)換成光的強(qiáng)度的差異,使細(xì)菌中的某部分結(jié)構(gòu)比其他部分深暗,襯托出鮮明的對比。本法主要用于檢查不染色活細(xì)菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
4.熒光顯微鏡:熒光顯微鏡以紫外光或藍(lán)紫光為光源,能激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)光使之成為可見光醫(yī)|學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。細(xì)菌經(jīng)熒光色素染色后,置于熒光顯微鏡下,即可激發(fā)熒光,因此在暗色的背景下可以看到發(fā)射熒光的細(xì)菌。由于紫外光與藍(lán)紫光的波長較短(0.3~0.4μm),故分辨率得到進(jìn)一步提高。熒光顯微鏡還廣泛應(yīng)用于免疫熒光技術(shù)中。
5.電子顯微鏡:電子顯微鏡以電子流代替光源,其波長極短(約為0.005nm),分辨能力大大提高,電磁圈代替普通顯微鏡的光學(xué)放大系統(tǒng),放大倍數(shù)可達(dá)數(shù)萬至數(shù)十萬倍,能分辨lnm的物體,細(xì)菌的表面形態(tài)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)均能清楚地顯現(xiàn)。