生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)
生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)
學(xué)習(xí)生物要講究方法和技巧,更要學(xué)會(huì)對(duì)知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行歸納整理。接下來(lái)學(xué)習(xí)啦小編為你整理了高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié),一起來(lái)看看吧。
高中生物選修一知識(shí)點(diǎn):DNA的粗提取與鑒定
提取DNA的溶解性原理包括DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度的特點(diǎn):在0.14mol/L時(shí)溶解度最小;要使DNA溶解,需要較高濃度?要使DNA析出,又需要0.14mol/L的濃度?
在溶解細(xì)胞中的DNA時(shí),人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水,以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機(jī)溶劑,但DNA卻不能溶于酒精(特別是95%冷卻酒精),但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。
從理論上分析,預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點(diǎn)。一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。
采用DNA不溶于酒精的原理,可以達(dá)到的目的是:將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。
提取DNA還可以利用DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時(shí),應(yīng)選用蛋白酶,因?yàn)槊妇哂袑?zhuān)一性,蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會(huì)對(duì)DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60~80℃,因?yàn)樵摐囟戎档鞍踪|(zhì)變性沉淀,而DNA不會(huì)變性。
補(bǔ)充:DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋,其溫度在80℃以上,如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95℃。
當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時(shí),需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定?
答:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。
原理總結(jié):通過(guò)利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細(xì)胞中提取和提純DNA;再利用酒精進(jìn)一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開(kāi)來(lái),達(dá)到提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。
實(shí)驗(yàn)材料的選?。?/p>
不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時(shí),應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。
本實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料有兩個(gè)原因。一是因?yàn)殡u血細(xì)胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細(xì)胞極易吸水脹破,而用動(dòng)物肝臟細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料常常需要?jiǎng)驖{和離心,對(duì)設(shè)備要求較高,操作繁瑣,歷時(shí)較長(zhǎng)。
雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取過(guò)程中為了減少DNA的損失,最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。
破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:
若選用雞血和洋蔥作實(shí)驗(yàn)材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?
答:在雞血細(xì)胞液中加入一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過(guò)濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過(guò)濾后收集濾液。
為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂?
答:蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來(lái)說(shuō)是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂,再加上攪拌的機(jī)械作用,就加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。
在以上實(shí)驗(yàn)中,加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?
答:過(guò)濾時(shí)應(yīng)當(dāng)選用(濾紙、尼龍布)。血細(xì)胞在蒸餾水中大量吸水而張裂;洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;食鹽溶解DNA物質(zhì);選用尼龍布進(jìn)行過(guò)濾。
在處理植物組織時(shí)需要進(jìn)行研磨,其目的是什么?研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?
答:破碎細(xì)胞壁,使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會(huì)使DNA的提取量減少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。具體做法。10mL雞血+20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過(guò)濾→濾液。
為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?
答:用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過(guò)反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。
最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì),需要進(jìn)一步提純DNA。
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;
方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。
方案二與方案三的原理有什么不同?
答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi);方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。
析出與鑒定:
在濾液中仍然含有一些雜質(zhì),怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNA呈何顏色?
答:濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻,靜置2~3分鐘,析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色。
怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢?
答:具體做法:試管2支,編號(hào)甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化。
實(shí)驗(yàn)操作:
制備雞血細(xì)胞液…………加檸檬酸鈉,靜置或離心
↓
破碎細(xì)胞,釋放DNA… 加蒸餾水,同一方向快速通方向攪拌
↓→過(guò)濾,除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等。
溶解核內(nèi)DNA………… 加入NaCl至2mol/L,同一方向緩慢攪拌
↓
DNA析出……………… 加蒸餾水至0.14mol/L,過(guò)濾,在溶解到2mol/L溶液中
↓→除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)。
DNA初步純化………… 與等體積95%冷卻酒精混合,析出白色絲狀物
↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。
DNA鑒定……………… 二苯胺,沸水浴,呈現(xiàn)藍(lán)色
注意事項(xiàng):在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細(xì)胞懸液濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過(guò)濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細(xì)胞破裂快速攪拌);玻棒不要碰到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。
高中生物選修一知識(shí)點(diǎn):果酒和果醋的制作
1、發(fā)酵:通過(guò)微生物技術(shù)的培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過(guò)程。
2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵、谷氨酸發(fā)酵
無(wú)氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵
3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌
酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要) 、分裂生殖、孢子生殖
4、在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖。C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O
5、在無(wú)氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。C6H12O6→2C2H5OH+2CO2
6、20℃左右最適宜酵母菌繁殖,酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18℃-25℃
7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過(guò)程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌。
在發(fā)酵過(guò)程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。
在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。
8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂。
9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?C2H5OH+4O2→CH3COOH+6H2O
10、控制發(fā)酵條件的作用:
?、俅姿峋鷮?duì)氧氣的含量特別敏感,當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí),即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣,也會(huì)引起醋酸菌死亡。
?、诖姿峋钸m生長(zhǎng)溫度為30~35℃,控制好發(fā)酵溫度,使發(fā)酵時(shí)間縮短,又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。
③有兩條途徑生成醋酸:直接氧化和以酒精為底物的氧化。
11、實(shí)驗(yàn)流程:挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒(→醋酸發(fā)酵→果醋)
12、酒精檢驗(yàn):果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)。在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴,振蕩試管,觀察顏色。
13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的;出料口是用來(lái)取樣的。
排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。開(kāi)口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)該充氣口連接氣泵,輸入氧氣。
高中生物選修一知識(shí)點(diǎn):腐乳的制作
1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營(yíng)腐生生活。
2、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。
3、實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制
4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。
前期發(fā)酵的主要作用:
1、創(chuàng)造條件讓毛霉生長(zhǎng)
2、使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。
后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過(guò)程。通過(guò)各種輔料與酶的緩解作用,生成腐乳的香氣。
5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右,水分過(guò)多則腐乳不易成形。
水分測(cè)定方法如下:精確稱(chēng)取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品5~10g(精確到0.02mg),置于已知重量的蒸發(fā)皿中,均勻攤平后,在100~105℃電熱干燥箱內(nèi)干燥4h,取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱(chēng)重,然后再烘30min,直至所稱(chēng)重量不變?yōu)橹埂?/p>
樣品水分含量(%)計(jì)算公式如下:
(烘干前容器和樣品質(zhì)量—烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量
毛霉的生長(zhǎng):條件:將豆腐塊平放在籠屜內(nèi),將籠屜中的控制在15~18℃,并保持一定的溫度。
來(lái)源:1.來(lái)自空氣中的毛霉孢子;2. 直接接種優(yōu)良毛霉菌種
時(shí)間:5天
加鹽腌制:將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中,同時(shí)逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。
用鹽腌制時(shí),注意控制鹽的用量:鹽的濃度過(guò)低,不足以抑制微生物的生長(zhǎng),可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);鹽的濃度過(guò)高會(huì)影響腐乳的口味
食鹽的作用:1.抑制微生物的生長(zhǎng),避免腐敗變質(zhì);2.析出水分,是豆腐變硬,在后期制作過(guò)程中不易酥爛;3.調(diào)味作用,給腐乳以必要的咸味;4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。
配制鹵湯:鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。
酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐;2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味;3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短有很大關(guān)系,酒精含量越高,對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長(zhǎng);酒精含量過(guò)低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。
香辛料的作用:1.調(diào)味作用;2.殺菌防腐作用;3.參與并促進(jìn)發(fā)酵過(guò)程
防止雜菌污染:①用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒;②裝瓶時(shí),操作要迅速小心。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí),最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。
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