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高中生物選修一知識點背誦

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高中生物選修一知識點背誦

  生物學(xué)科是一門以實驗為基礎(chǔ)的自然學(xué)科,通過實驗教學(xué),有助于學(xué)生知識的獲取以及實驗?zāi)芰?、合作精神等的培養(yǎng)。選修一有哪些知識點是需要背誦的呢?接下來學(xué)習(xí)啦小編為你整理了高中生物選修一知識點背誦,一起來看看吧。

  高中生物選修一知識點背誦(一)

  培養(yǎng)基:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。

  培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。

  微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。

  按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實際工業(yè)生產(chǎn)。

  按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。

  培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等。

  碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。

  氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無機氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。

  培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。

  獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個方面:

  ①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒。

  ②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。

  ③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。

  ④實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

  消毒與滅菌的區(qū)別:

  消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。

  滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

  滅菌方法:

  ①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;

 ?、诓A髅?、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱 ;

 ?、叟囵B(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 ;

  ④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈 。

  比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅

  消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能

  滅菌強烈全部微生物能

  制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:

  (1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

  (2)倒平板操作的步驟:

 ?、賹邕^菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。

  ②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。

 ?、塾米笫值哪粗负褪持笇⑴囵B(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。

 ?、艿却桨謇鋮s凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。

  高中生物選修一知識點背誦(二)

  1. 培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?

  提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。

  2. 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?

  答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

  3. 平板冷凝后,為什么要將平板倒置?

  答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。

  4. 在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?

  答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。

  純化大腸桿菌:

  (1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

  (2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。

  (3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。

  (4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落,以便于純化菌種。

  (5)平板劃線法操作步驟:

 ?、賹⒔臃N環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。

 ?、谠诨鹧媾岳鋮s接種環(huán),并打開棉塞。

  ③將試管口通過火焰。

  ④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。

  ⑤將試管通過火焰,并塞上棉塞。

 ?、拮笫謱⒚笊w打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。

 ?、咦茻臃N環(huán),待其冷卻后,從第 一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

  ⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

  平板劃線操作的討論:

  1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?

  答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;

  每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。

  劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。

  2. 在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?

  答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。

  3. 在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?

  答:劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

  (6)涂布平板操作的步驟:

 ?、賹⑼坎计鹘谑⒂芯凭臒?。

  ②取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。

 ?、蹖⒄从猩倭烤凭耐坎计髟诨鹧嫔弦?,待酒精燃盡后,冷卻8~10s。

 ?、苡猛坎计鲗⒕壕鶆虻赝坎荚谂囵B(yǎng)基表面。

  涂布平板操作的討論:

  涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作?

  提示:應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。

  菌種的保存:

  (1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法。

 ?、倥R時保藏方法

  將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當菌落長成后,將試管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3~6個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。

 ?、谌秉c:這種方法保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。

  (2)對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。

  在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃的冷凍箱中保存。

  課題二 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)

  尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素,是因為他們能合成脲酶。尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的。

  篩選菌株:

  (1)實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理

  人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同時抑制或阻止其他微生物生長。

  (2)選擇性培養(yǎng)基

  在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。

  (3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)

  根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物質(zhì)以達到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。

  統(tǒng)計菌落數(shù)目:

  (1)測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。

  (2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理。

  當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確,一般設(shè)置3~5個平板,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。

  采用此方法的注意事項:

  1、一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù)

  2、為了防止菌落蔓延,影響計數(shù),可在培養(yǎng)基中加入TTC

  3、本法僅限于形成菌落的微生物

  設(shè)置對照:設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是指除了被測試的條件以外,其他條件都相同的實驗,其作用是比照試驗組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。

  實驗設(shè)計:實驗設(shè)計包括實驗方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實施步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。

  (1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長。從富含有機物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約3~8cm的土壤層取樣。

  (2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計數(shù)的平板。

  測定土壤中細菌的數(shù)量,一般選用104 105 106

  測定放線菌的數(shù)量,一般選用103 104 105

  測定真菌的數(shù)量,一般選用102 103 104

  (3)微生物的培養(yǎng)與觀察

  不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細菌30~37℃,1~2天;放線菌25~28℃,5~7天;霉菌25~28℃,3~4天

  每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。

  高中生物選修一知識點背誦(三)

  1. 培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?

  提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。

  2. 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?

  答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

  3. 平板冷凝后,為什么要將平板倒置?

  答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。

  4. 在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?

  答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。

  純化大腸桿菌:

  (1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

  (2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。

  (3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。

  (4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落,以便于純化菌種。

  (5)平板劃線法操作步驟:

 ?、賹⒔臃N環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。

 ?、谠诨鹧媾岳鋮s接種環(huán),并打開棉塞。

 ?、蹖⒃嚬芸谕ㄟ^火焰。

 ?、軐⒁牙鋮s的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。

 ?、輰⒃嚬芡ㄟ^火焰,并塞上棉塞。

 ?、拮笫謱⒚笊w打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。

 ?、咦茻臃N環(huán),待其冷卻后,從第 一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

  ⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

  平板劃線操作的討論:

  1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?

  答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;

  每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。

  劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。

  2. 在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?

  答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。

  3. 在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?

  答:劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

  (6)涂布平板操作的步驟:

 ?、賹⑼坎计鹘谑⒂芯凭臒小?/p>

 ?、谌∩倭烤海渭拥脚囵B(yǎng)基表面。

 ?、蹖⒄从猩倭烤凭耐坎计髟诨鹧嫔弦迹凭急M后,冷卻8~10s。

 ?、苡猛坎计鲗⒕壕鶆虻赝坎荚谂囵B(yǎng)基表面。

  涂布平板操作的討論:

  涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作?

  提示:應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。

  菌種的保存:

  (1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法。

 ?、倥R時保藏方法

  將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當菌落長成后,將試管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3~6個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。

 ?、谌秉c:這種方法保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。

  (2)對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。

  在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃的冷凍箱中保存。

  課題二 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)

  尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素,是因為他們能合成脲酶。尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的。

  篩選菌株:

  (1)實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理

  人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同時抑制或阻止其他微生物生長。

  (2)選擇性培養(yǎng)基

  在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。

  (3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)

  根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物質(zhì)以達到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。

  統(tǒng)計菌落數(shù)目:

  (1)測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。

  (2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理。

  當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確,一般設(shè)置3~5個平板,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。

  采用此方法的注意事項:

  1、一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù)

  2、為了防止菌落蔓延,影響計數(shù),可在培養(yǎng)基中加入TTC

  3、本法僅限于形成菌落的微生物

  設(shè)置對照:設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是指除了被測試的條件以外,其他條件都相同的實驗,其作用是比照試驗組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。

  實驗設(shè)計:實驗設(shè)計包括實驗方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實施步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。

  (1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長。從富含有機物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約3~8cm的土壤層取樣。

  (2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計數(shù)的平板。

  測定土壤中細菌的數(shù)量,一般選用104 105 106

  測定放線菌的數(shù)量,一般選用103 104 105

  測定真菌的數(shù)量,一般選用102 103 104

  (3)微生物的培養(yǎng)與觀察

  不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細菌30~37℃,1~2天;放線菌25~28℃,5~7天;霉菌25~28℃,3~4天

  每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。


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