高中生物基因工程核心知識(shí)點(diǎn)
高中生物基因工程核心知識(shí)點(diǎn)
基因工程這部分內(nèi)容在高中生物必修2及選修3教材中都有出現(xiàn)，我們需要掌握哪些相關(guān)核心知識(shí)點(diǎn)?下面是學(xué)習(xí)啦小編給大家?guī)淼母咧猩锘蚬こ毯诵闹R(shí)點(diǎn)，希望對(duì)你有幫助。
高中生物基因工程核心知識(shí)點(diǎn)
基因工程的概念
基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
(1)來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。
(2)功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。
(3)結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。
2.“分子縫合針”——DNA連接酶
(1)兩種DNA連接酶(E•coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較：
①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。
?、趨^(qū)別：E•coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。
(2)與DNA聚合酶作用的異同:¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。
3.“分子運(yùn)輸車”——載體
(1)載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。
?、诰哂幸恢炼鄠€(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。
?、劬哂袠?biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。
(2)最常用的載體是¬¬質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。
(3)其它載體： 噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的獲取
1.目的基因是指： 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。
2.原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。
3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
(1)原理：DNA雙鏈復(fù)制
(2)過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈;第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。
第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建
1.目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。
2.組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因
(1)啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。
(2)終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ，位于基因的尾端。
(3)標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。
第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_
1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。
2.常用的轉(zhuǎn)化方法：
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。
將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是 顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是 受精卵。
將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少 ，最常用的原核細(xì)胞是 大腸桿菌 ，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca2+ 處理細(xì)胞，使其成為 感受態(tài)細(xì)胞 ，再將 重組表達(dá)載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。
3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。
第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)
1.首先要檢測(cè) 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。
2.其次還要檢測(cè) 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與 mRNA雜交。
3.最后檢測(cè) 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。
4.有時(shí)還需進(jìn)行 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。
(三)基因工程的應(yīng)用
1.植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。
2.動(dòng)物基因工程：提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。
3.基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。
(四)蛋白質(zhì)工程的概念
蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))
高中生物學(xué)法指導(dǎo)
1，記憶。生物稱為理科中的文科，要掌握的知識(shí)點(diǎn)許多都是需要記憶的。有些是要求理解記憶，而有些一定要一字不漏的背誦。對(duì)于課本大量的描述性文字，比如一種結(jié)論的得出前的推理，或是一種生物行為或現(xiàn)象的描述，或是一種實(shí)驗(yàn)或技術(shù)的操作步驟，全部背誦是不可能的，但要求合上書可以用盡可能專業(yè)的語言自己描述。達(dá)到這一點(diǎn)不容易，因?yàn)橐⒃趯?duì)書本很熟，對(duì)知識(shí)理解得很徹底的基礎(chǔ)上，具體來說，把生物書當(dāng)畫書看，多想，多問，細(xì)節(jié)不能放過。
2.了解。生物學(xué)科知識(shí)點(diǎn)多，雜，有許多雖然大綱沒有說明，但對(duì)于學(xué)習(xí)生物有很好的輔助作用。比如一些和生活息息相關(guān)的實(shí)例，一些老師補(bǔ)充的知識(shí)，課外可以聯(lián)系的知識(shí)，最好要了解，要知道。
3 復(fù)習(xí)。生物復(fù)習(xí)很重要。這里有個(gè)很實(shí)用的方法：生物書上的許多圖，不看文字，自己根據(jù)圖將自己所知的知識(shí)用連貫，簡(jiǎn)潔，專業(yè)的語言把自己作為一個(gè)講解員講解此圖。如果有條件，兩個(gè)同學(xué)輪流互相講解提問效果更好。這點(diǎn)對(duì)知識(shí)的歸納和梳理很有效，而且可以脫離課本章節(jié)的限制，使知識(shí)融會(huì)貫通。當(dāng)然看錯(cuò)題也很重要。
4 做題。選擇題主要是硬功夫，更多的同學(xué)大題目怎么也提不上去。這一點(diǎn)主要是很多同學(xué)沒有真正理解生物學(xué)科的真諦和竅門。語言的控制和使用不準(zhǔn)確。具體的做最笨但最好實(shí)施的方法就是背，背好的，經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)題。總之，學(xué)習(xí)因人而異，找到最適合自己的方法才是上上策。
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