高二生物基因工程知識點梳理
高二生物基因工程知識點梳理
基因工程是高二學生在學習生物學科時要掌握的重要知識點。為了幫助學生掌握基因工程知識點,下面學習啦小編為高二學生整理了生物基因工程知識點,希望對大家有所幫助!
高二生物基因工程知識點
一、基因工程的概念
基因工程是指按照人們的愿望,進行嚴格的設計,通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術,賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的,又叫做DNA重組技術。
二、基因工程的原理及技術
原理:基因重組技術
基因工程的基本工具
1.“分子手術刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。
(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。
(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端.
2.“分子縫合針”——DNA連接酶
(1)兩種DNA連接酶(E•coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:
?、?相同點:都縫合磷酸二酯鍵。
?、?區(qū)別:E•coliDNA連接酶來源于T4噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。
(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3.“分子運輸車”——載體
(1)載體具備的條件:
?、倌茉谑荏w細胞中復制并穩(wěn)定保存。
?、诰哂幸恢炼鄠€限制酶切點,供外源DNA片段插入。
③具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。
(2)最常用的載體是質(zhì)粒:
它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。
(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病毒
基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的獲取
1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。
2.原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。
3.PCR技術擴增目的基因
(1)原理:DNA雙鏈復制
(2)過程:①加熱至90~95℃DNA解鏈;
?、诶鋮s到55~60℃,引物結(jié)合到互補DNA鏈;
?、奂訜嶂?0~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成
第二步:基因表達載體的構(gòu)建
1.目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
2.組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因
(1)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。
(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。
(3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因。
第三步:將目的基因?qū)胧荏w細胞
1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。
2.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。
3.將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛S玫姆椒ㄊ?顯微注射技術。此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎?/p>
4.重組細胞導入受體細胞后,篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是
標記基因是否表達.
第四步:目的基因的檢測和表達
1.首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交技術.
2.其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用 用標記的目的基因作探針與mRNA
雜交。
3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取
蛋白質(zhì),用相應的抗體進行抗原-抗體雜交。
4.有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。
基因工程的應用:
1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。
2.動物基因工程:提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物。
3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用。
蛋白質(zhì)工程的概念:
蛋白質(zhì)工程:
是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))
(1)蛋白質(zhì)工程崛起的緣由:基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)
(2)蛋白質(zhì)工程的基本原理:它可以根據(jù)人的需求來設計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),又稱為第二代的基因工程。
(3)基本途徑:從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測應有的氨基酸序列,找到相對應的脫氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑;以下按照基因工程的一般步驟進行。(注意:目的基因只能用人工合成的方法)
(4)設計中的困難:如何推測非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核苷酸序列
高二生物基因工程練習
1.(2018年高考浙江理綜)在用基因工程技術構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中,下列操作錯誤的是( )
A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸
B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體
C.將重組DNA分子導入煙草原生質(zhì)體
D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞
解析:構(gòu)建重組DNA分子時,需用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體,再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子,而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,所以A項錯誤。重組DNA分子形成后要導入受體細胞(若是植物細胞,則可導入其原生質(zhì)體),若導入的受體細胞是體細胞,經(jīng)組織培養(yǎng)可獲得轉(zhuǎn)基因植物。目的基因為抗除草劑基因,所以未成功導入目的基因的細胞不具有抗除草劑的能力,可用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞。
答案:A
2.(2018年高考江蘇卷)下列關于轉(zhuǎn)基因植物的敘述,正確的是( )
A.轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因,可能通過花粉傳入環(huán)境中
B.轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物,不會導致昆蟲群體抗性基因頻率增加
C.動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達
D.如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界,則不存在安全性問題
解析:轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因可能會通過花粉被油菜的近緣物種接受,造成意料之外的抗除草劑基因傳播,形成基因污染,有可能會對生態(tài)系統(tǒng)的平衡和穩(wěn)定構(gòu)成威脅,A項正確;在轉(zhuǎn)入抗蟲基因后,不能適應這種抗蟲植物的昆蟲的死亡率將大大增加,只有存在對應的抗性基因的昆蟲才能生存下來,增加了昆蟲群體中抗性基因的頻率,B項錯誤;生物界中所有物種基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯用同一套密碼子和相同的氨基酸,所以動物的生長激素基因可以在植物體內(nèi)得到表達,C項錯誤;即便轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自于自然界,通過轉(zhuǎn)基因工程后,可能會使目標生物出現(xiàn)非正常進化過程中的性狀改變,有可能會影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,D項錯誤。
答案:A
3.(2018年高考全國理綜Ⅱ)下列敘述符合基因工程概念的是( )
A.B淋巴細胞與腫瘤細胞融合,雜交瘤細胞中含有B淋巴細胞中的抗體基因
B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株
C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株
D.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上
解析:基因工程是指按照人們的意愿,進行嚴格的設計,并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術,創(chuàng)造出符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的。選項中A項屬于細胞工程,C項屬于人工誘變,D項屬于基因重組,只有B項符合基因工程的概念,其中人的干擾素基因是目的基因,質(zhì)粒是運載體,大腸桿菌是受體細胞,人們需要的生物產(chǎn)品是人干擾素。
答案:B
4.下列關于基因工程應用的敘述,正確的是( )
A.基因治療就是把缺陷基因誘變成正?;?/p>
B.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交
C.一種基因探針能檢測水體中的各種病毒
D.利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗時,目的基因存在于人體B淋巴細胞的DNA中
解析:基因治療是把正?;?qū)胗谢蛉毕莸募毎?基因診斷是讓正常人的DNA與病人基因組中分離出的DNA進行雜交來診斷疾病;一種基因探針只能檢測水體中的一種病毒;利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗時的目的基因是乙肝病毒的核酸。
答案:B
5.(2018年海淀檢測)近年來基因工程的發(fā)展非常迅猛,科學家可以用DNA探針和外源基因?qū)氲姆椒ㄟM行遺傳病的診斷和治療,下列做法中不正確的是( )
A.用DNA探針檢測鐮刀型細胞貧血癥
B.用DNA探針檢測病毒性肝炎
C.用導入外源基因的方法治療半乳糖血癥
D.用基因替換的方法治療21三體綜合征
解析:鐮刀型細胞貧血癥是由于基因突變引起的疾病,用β-珠蛋白的DNA探針可以檢測到;用DNA探針也可以很方便地檢測出肝炎患者的病毒;半乳糖血癥是由于體內(nèi)缺少半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶,將帶有半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶的基因?qū)氚肴樘茄Y患者的體內(nèi),可以治療這種疾病;21三體綜合征是由于患者多了一條21號染色體,不能用基因替換的方法治療。
答案:D
6. 線性DNA分子的酶切示意圖
(2008年高考全國理綜Ⅰ)已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點,如右圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?,F(xiàn)有多個上述線性DNA分子,若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是( )
A.3 B.4 C.9 D.12
解析:若每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則多個線性DNA可以切得的種類有:a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九種。
答案:C
7.(2018年南京模擬)如圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因。判斷下列說法正確的是( )
A.將重組質(zhì)粒導入細菌B常用的方法是顯微注射法
B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能生長的只是導入了重組質(zhì)粒的細菌
C.將完成導入過程后的細菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,能生長的就是導入了質(zhì)粒A的細菌
D.目的基因成功表達的標志是受體細胞能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長
解析:若導入了質(zhì)粒,由于含有抗四環(huán)素基因,細菌可在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。
答案:C
8.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體,它存在于許多細菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標記基因如圖所示,通過標記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點有a、b、c),請根據(jù)表中提供的細菌生長情況,推測①②③三種重組后細菌的外源基因插入點,正確的一組是( )
A.①是c;②是b;③是a
B.①是a和b;②是a;③是b
C.①是a和b;②是b;③是a
D.①是c;②是a;③是b
解析:對①細菌來說,能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長,也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,說明抗青霉素基因和抗四環(huán)素基因沒有被破壞,插入點是c;對②細菌來說,能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗青霉素基因正常,不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗四環(huán)素基因被破壞,插入點應為b;對③細菌來說,不能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長,說明其抗青霉素基因被插入而破壞,故插入點為a。
答案:A
高二生物必考知識點
應激性(生物個體對外界的刺激會產(chǎn)生一定反應,應激性是動態(tài)過程)與適應性(包含應激性,也含靜態(tài)的適應特征,例如動植物的保護色),它們都由基因遺傳性所決定。
生物工程包含三大部分:分別是基因工程、生物細胞工程(上游技術)和生物發(fā)酵工程、酶工程(下游技術)
生命的共性包含共同的物質(zhì)基礎(化合物、元素)、核苷酸種類、氨基酸種類、RNA和DNA的排列結(jié)構(gòu)方式、基因結(jié)構(gòu)(非編碼區(qū)和編碼區(qū))、遺傳密碼等。
元素含量占細胞鮮重最多是氧。含量從多少到分別是O、C、H、N、P、S,細胞中最最基本元素是C。
生物體中無機鹽的功能和作用:如缺鐵導致紅細胞運輸氧氣能力下降,體現(xiàn)維持細胞的生命活動作用;缺鐵導致人貧血,體現(xiàn)維持生物體的生命活動作用。其次構(gòu)成復雜化合物的作用。
植物細胞中的三大儲能物質(zhì)分別是:脂肪、淀粉、蛋白質(zhì);動物細胞中的重要儲能物質(zhì)主要是脂肪和蛋白質(zhì)。區(qū)分直接能源、主要能源、儲備能源、根本能源。
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性原因(4個),DNA結(jié)構(gòu)多樣性原因(3個),DNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性原因(3個)
細胞大小在微米水平,電鏡下可看到直徑小于0。2微米的細微結(jié)構(gòu)。最小的細胞是支原體。
蛋白質(zhì)的基本元素是C、H、O、N,S是其特征元素;核酸的基本元素是C、H、O、N、P,P是其特征元素;血紅蛋白的元素是C、H、O、N、Fe,葉綠素的元素是C、H、O、N、Mg,吲哚乙酸的元素是C、H、O、N;不含礦質(zhì)元素的是糖類和脂肪。
原核細胞的特點有①無核膜、核仁②無染色體③僅有核糖體④細胞壁成分是肽聚糖⑤遺傳不遵循三大規(guī)律⑥僅有的可遺傳變異是基因突變⑦無生物膜系統(tǒng)⑧基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)連續(xù) ;乳動物成熟紅細胞無細胞核和線粒體,不分裂,進行無氧呼吸??勺鳛樘崛〖毎さ暮貌牧?。
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