微生物檢驗技術(shù)論文(2)
微生物檢驗技術(shù)論文
微生物檢驗技術(shù)論文篇二
淺談空氣微生物的檢驗技術(shù)
摘要：目的： 探討空氣微生物的檢驗措施。方法： 通過實驗室的科學(xué)檢驗，掌握空氣微生物的屬性與致病因素，總結(jié)出系統(tǒng)的檢驗措施和相應(yīng)的控制方法。結(jié)論： 科學(xué)準(zhǔn)確的掌握空氣微生物的檢驗措施，把握致病規(guī)律，才能為有效的控制和預(yù)防相關(guān)疾病提供可靠的依據(jù)。
關(guān)鍵詞：空氣微生物;檢驗;細(xì)菌
【中圖分類號】R446.5 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)01-0188-01
存在于空氣中的微生物。是主要的空中浮游生物。對較干燥環(huán)境和對紫外線具有抗性的種類，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的球菌屬(包括八疊球菌屬在內(nèi)的好氧菌);形成孢子的好氧性桿菌(如枯草芽孢桿菌);色串孢屬等野生酵母;青霉等霉菌的孢子等。下面將空氣微生物的檢驗技術(shù)分析匯報如下。
1各類微生物的基本檢驗程序
空氣中微生物檢驗主要分為細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體類的檢驗。
2幾種常見空氣微生物采樣
方法及細(xì)菌菌落總數(shù)測定
2.1Andersen采樣器
2.1.1構(gòu)造： 新型采樣器是Andersenl958年研制而成由采樣膠體、流量劑、壓力計和抽氣泵組成。
2.1.2特點： ①采集空氣微粒范圍寬;
?、诓蓸有矢?
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?、苊舾行愿?
⑤操作簡便;
?、迲?yīng)用范圍廣，常用于空氣致病微生物的采集。
2.1.3操作步驟：①消毒
采樣器的消毒方法有3種：75%酒精;高壓蒸氣滅菌：用于采樣頭的消毒;環(huán)氧乙烷消毒。
?、谟嘘P(guān)參數(shù)設(shè)定：
流量，28.3L/min，固定流量抽吸空氣，流量準(zhǔn)確與否是該采樣器操作的關(guān)鍵所在，流量不準(zhǔn)或未經(jīng)校正的采樣器不可使用。真空度，0.1354kPa。若真空度不夠，可影響氣流速度，從而影響采樣效率。
③平皿制備
采樣用培養(yǎng)基平皿要提前一天準(zhǔn)備好，每個樣品需6個平皿，預(yù)置37℃18～24h培養(yǎng)，無細(xì)菌生長，即可用于采樣。
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根據(jù)采樣目的而定，一般置于人的呼吸帶高度，大約1.0～1.5m左右，并且采樣人員應(yīng)遠(yuǎn)離采樣頭。采集時間要根據(jù)現(xiàn)場微生物污染程度而定。
?、菖囵B(yǎng)
打開采樣器，蓋上平皿蓋。細(xì)菌培養(yǎng)37℃培養(yǎng)48h，真菌培養(yǎng)28℃培養(yǎng)72h。
?、蘧溆嫈?shù)：計數(shù)方法可以采用分段計數(shù)及菌落計數(shù)器進行。一般以菌落形成單位表示。一般每個平皿最多不超過250cfu。
2.2THK-201型采樣器
2.2.1構(gòu)造： THK-201型采樣器是在JWL型采樣器基礎(chǔ)上改進而成。基本構(gòu)成包括：采樣頭、流量計、抽氣泵、可調(diào)電路。
2.2.2特性： ①采樣頭的篩孔(隙)為可調(diào)式;
②捕獲率高;
?、圻m應(yīng)范圍廣，在不同環(huán)境通過調(diào)節(jié)篩孔來采集不同大小的微粒提高了其應(yīng)用范圍，可采集細(xì)菌、真菌、病毒、立克次體、原生動物、植物、花粉、藻類等，適用于環(huán)保、生物工程、醫(yī)療衛(wèi)生、衛(wèi)生防疫、工農(nóng)牧業(yè)、食品加工業(yè)等;
?、芄δ荦R全。
2.2.3操作步驟： ①平板制備
制作平皿培養(yǎng)基應(yīng)注意厚薄均勻，保證無菌。瓊脂濃度要較其他采樣方法略高一點(≤2.4%)，過高過低均會影響采樣效率。
?、趦x器相關(guān)參數(shù)
電源，工作電壓：220V;轉(zhuǎn)速，選檔，定時范圍;流量，5～35L/min;采樣篩頭，最小狹縫≤20μm，最大500μm。根據(jù)需要分級調(diào)節(jié)，使用時要對環(huán)境中微生物有一個大略估計，以便進行篩孔調(diào)節(jié)。
③培養(yǎng)
方法和時間同Andersen采樣器。
2.3自然沉降采樣法
2.3.1特點：①簡便易操作，不需特殊采樣器，只需采樣的平皿培養(yǎng)基。
②能反映沉降細(xì)菌的數(shù)量，特別是醫(yī)院的燒傷外科、手術(shù)室、人流室等一些相對空氣流動性不大，但空氣中微生物在靜止時下落到物表，造成污染，更嚴(yán)重的造成院內(nèi)感染。
?、劭捎糜诖致苑从晨諝庵屑?xì)菌污染狀況。
?、艽朔ú蛔阒帲河孟侣渚扑憧諝庵袘腋【浚型评砩系腻e誤。比較公認(rèn)的是奧梅梁斯基的公式來推算濃度，他認(rèn)為在100cm2培養(yǎng)基表面，5min內(nèi)能落下約10L空氣中所含菌量。標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌種類較少。采樣條件要保證無菌狀態(tài)，十分難以控制[1]。
2.3.2自然沉降法采樣的操作步驟：①培養(yǎng)基的制備：
一般采用9cm直徑平皿制作。細(xì)菌用普通營養(yǎng)瓊脂，真菌用沙堡培養(yǎng)基或察氏培養(yǎng)基。制備好的平板應(yīng)置35～37℃預(yù)培養(yǎng)18～24h，選無菌生長的平皿用于采樣。
②選擇檢測點：
室內(nèi)面積≤30m2沿一對角線上取三點，即中間一點兩端各距墻1m處各取一點，室內(nèi)面積>30m2，設(shè)東、南、西、北、中5個點，各點均距墻1m，采樣高度0.8～1.5m。若使用采樣器監(jiān)測時，采樣器應(yīng)距地面高度33cm，離門窗及人員流動1m以上，且采樣器與采樣者要保持一定距離(50cm)，防止采樣者自身細(xì)菌被吸入采樣器而影響檢測結(jié)果。室外采樣要根據(jù)該地區(qū)氣象、交通、大氣污染程度、建筑物布局、有無樹林等進行合理選點，選點數(shù)不定，每個點采樣高度1.5m以上?？梢砸粋€點同時放置兩個平皿，以平均菌落數(shù)代表該點的菌落數(shù)。
?、郾┞镀窖獣r間：
原則是保證客觀反映采樣點情況，采樣后平皿中生長的菌落數(shù)要便于準(zhǔn)確計數(shù)，太多以至于無法計數(shù)將造成較大偏差，一般潔凈室內(nèi)暴皿時間可在5～30min，一般室內(nèi)較潔凈的地方，多采用暴皿5min即可。
?、芘囵B(yǎng)：
細(xì)菌樣品35～37℃培養(yǎng)48h，真菌樣品置28℃培養(yǎng)72h。
2.4JWL型采樣器
2.4.1結(jié)構(gòu)： 由采樣頭、流量計、抽氣泵、電源電路4部分構(gòu)成。
2.4.2特點： ①采樣的平皿可以轉(zhuǎn)動，使平皿上菌落均勻分布;
?、诮灰恢绷鲀捎?，應(yīng)用簡便;
③自動按時采樣，可采細(xì)菌和病毒;
?、艿珜諝庵姓即蠖鄶?shù)的粒子捕獲率低。
2.4.3操作步驟： ①平皿制備
細(xì)菌用普通瓊脂，真菌用選擇性培養(yǎng)基(如察氏培養(yǎng)基)。平皿要求厚薄均勻，表面水平，加培養(yǎng)基量4.5ml，瓊脂濃度1.8%～2.4%為宜。
?、诓蓸酉嚓P(guān)參數(shù)的調(diào)整
電源，220V，備24V直流蓄電池;流量調(diào)節(jié)，25～30L/min;空氣壓力，采樣系統(tǒng)98～245kPa，電氣系統(tǒng)為86.6～106.6kPa;采樣時間，一次不得超過15min;采樣高度，1.0～1.5m[2]。
③培養(yǎng)
同Andersen采樣法。
參考文獻
[1]吳冬檸，韋彩嬌，余波.百色城區(qū)高校大學(xué)生宿舍空氣微生物的監(jiān)測與分析.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2013，35(05)：667-667.
[2]談書勤，胡貴方，顧大勇.空氣微生物氣溶膠富集、檢測與空氣消毒技術(shù)研究進展.中國消毒學(xué)雜志，2012，29(12)：1115-1120.
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