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什么是轉基因技術

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什么是轉基因技術

  轉基因技術的理論基礎來源于進化論衍生來的分子生物學。那么你對轉基因技術了解多少呢?以下是由學習啦小編整理關于什么是轉基因技術的內容,希望大家喜歡!

  轉基因技術的目的

  (1)提取目的基因 從生物有機體復雜的基因組中,分離出帶有目的基因的DNA片段,或者人工合成目的基因,或從基因文庫中提取相應的基因片段和PCR技術進行目的基因的增殖。

  (2) 將目的基因與運載體結合 在細胞外, 將帶有目的基因的DNA片段通過剪切、粘合連接到能夠自我復制并具有多個選擇性標記的運輸載體分子(通常有質粒、T4噬菌體、動植物病毒等)上, 形成重組DNA分子。

  (3) 將目的基因導入受體細胞 將重組DNA分子注入到受體細胞(亦稱宿主細胞或寄主細胞) ,將帶有重組體的細胞擴增,獲得大量的細胞繁殖體。

  (4) 目的基因的篩選 從大量的細胞繁殖群體中,通過相應的試劑篩選出具有重組DNA分子的重組細胞。

  (5) 目的基因的表達 將得到的重組細胞,進行大量的增殖,得到相應表達的功能蛋白,表現出預想的特性,達到人們的要求。

  轉基因技術的主要分類

  轉基因過程按照途徑可分為人工轉基因和自然轉基因,按照對象可分為植物轉基因技術、動物轉基因技術和微生物基因重組技術。

  人工轉基因

  將人工分離和修飾過的基因導入到生物體基因組中,由于導入基因的表達,引起生物體的性狀的可遺傳的修飾,這一技術稱之為轉基因技術(Transgene technology)。人們常說的“遺傳工程”、“基因工程”、“遺傳轉化”均為轉基因的同義詞。如今,改變動植物性狀的人工技術往往被稱為轉基因技術(狹義),而對微生物的操作則一般被稱為遺傳工程技術(狹義)。

  經轉基因技術修飾的生物體在媒體上常被稱為“遺傳修飾過的生物體”(Genetically modified organism,簡稱GMO)。

  自然轉基因

  不是人為導向的,自然界里動物、植物或微生物自主形成的轉基因現象,例如慢病毒載體 里的乙型肝炎病毒DNA整合到人精子細胞染色體上、噬菌體將自己DNA的插入到溶源細胞DNA上,農桿菌 和 花椰菜花葉病毒(CMV)等。

  植物轉基因

  植物轉基因是基因組中含有外源基因的植物。它可通過原生質體融合、細胞重組、遺傳物質轉移、染色體工程技術獲得,有可能改變植物的某些遺傳特性,培育高產、優(yōu)質、抗病毒、抗蟲、抗寒、抗旱、抗?jié)场⒖果}堿、抗除草劑等的作物新品種,如玉米稻 、北極鱷梨、轉基因三倍體毛白楊。而且可用轉基因植物或離體培養(yǎng)的細胞,來生產外源基因的表達產物,如人的生長激素、胰島素、干擾素、白介素2、表皮生長因子、乙型肝炎疫苗等基因已在轉基因植物中得到表達。

  動物轉基因

  動物轉基因就是基因組中含有外源基因的動物。它是按照預先的設計,通過細胞融合、細胞重組、遺傳物質轉移、染色體工程和基因工程技術將外源基因導入精子、卵細胞或受精卵,再以生殖工程技術,有可能育成轉基因動物。

  通過生長素基因、多產基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗病毒基因等基因轉移,可能育成生長周期短,產仔、生蛋多和泌乳量高,轉基因超級鼠比普通老鼠大約一倍。生產的肉類、皮毛品質與加工性能好,并具有抗病性,已在牛、羊、豬、雞、魚等家養(yǎng)動物中取得一定成果。

  但由于轉基因動物受遺傳鑲嵌性和雜合性的影響,其有性生殖后代變異較大,難以形成穩(wěn)定遺傳的轉基因品系。因而,嘗試將外源基因導入線粒體,再送入受精卵中,由于線粒體的細胞質遺傳,其有性后代可能全都是轉基因個體,從而解決這一問題。

  微生物重組

  在所有轉基因技術中,以微生物基因重組技術應用最為寬泛和常見。

  與動植物不同的是,微生物重組技術通常需要用到專門的重組基因載體——質粒。質粒是一種細胞質遺傳因子,因此具有不穩(wěn)定的遺傳特性。但相比于動植物,微生物重組技術具有周期短、效果顯著、控制性強的特點,因而廣泛應用于生物醫(yī)藥和酶制劑行業(yè)。經過多年的理論奠基,現已在微生物領域中開發(fā)出酵母表達系統(tǒng)、大腸桿菌表達系統(tǒng)和絲狀真菌表達系統(tǒng),其中畢赤酵母表達系統(tǒng)和大腸桿菌表達系統(tǒng)最受歡迎,具有表達效率高(外源蛋白占細胞總蛋白的10%至40%)、生產成本低的特點,一般常見的諸如胰島素、白細胞介素、α-高溫淀粉酶、重組人p53腺病毒注射液、啤酒酵母乙肝疫苗、抗生素、飼料用木聚糖酶、殼聚糖酶等都由這兩種表達系統(tǒng)生產的。

  轉基因技術的原理

  轉基因技術的原理是將人工分離和修飾過的優(yōu)質基因,導入到生物體基因組中,從而達到改造生物的目的。由于導入基因的表達,引起生物體的性狀,可遺傳的修飾改變,這一技術稱之為人工轉基因技術(Transgene technology)。

  人工轉基因技術就是把一個生物體的基因轉移到另一個生物體DNA中的生物技術。具有不確定性。常用的方法和工具包括顯微注射、基因槍、電破法、脂質體等。轉基因最初用于研究基因的功能,即把外源基因導入受體生物體基因組內(一般為模式生物,如擬南芥或斑馬魚等),觀察生物體表現出的性狀,達到揭示基因功能的目的。

  植物

  轉基因植物是基因組中含有外源基因的植物。通過原生質體融合、細胞重組、遺傳物質轉移、染色體工程技術獲得,改變植物的某些遺傳特性,培育優(yōu)質新品種,或生產外源基因的表達產物,如胰島素等。

  在過去的二十年里,隨著分子生物學各領域的不斷發(fā)展,植物基因的分離、基因工程載體的構建、細胞的基因轉化、轉化細胞的組織培養(yǎng)、植株再生及外源基因表達的檢測等各項技術日趨成熟和完善,有關植物基因工程的研究日新月異,許多以前根本不可能的基因轉化工作在越來越多的植物上獲得成功。

  研究轉基因植物的主要目的是提高多肽或工業(yè)用酶的產量,改善食品質量,提高農作物對蟲害及病原體的抵抗力。常規(guī)的藥用蛋白大部分是利用生化的方法提取或微生物發(fā)酵獲得的,這類活性物質一般在活細胞中含量甚微,且提取過程復雜,成本高,遠遠滿足不了社會的需要。應用轉基因植物來生產這些藥用蛋白,包括疫苗、抗體、干擾素等細胞因子,可以利用植物大田栽種的方式大量生產,大幅度降低生產成本,提高產量,還可以獲得常規(guī)手段無法獲得的藥物。

  利用植物來生產疫苗的最大優(yōu)點是他可以作為食品直接口服。通過各種植物轉基因技術將多臺疫苗基因轉入植物,從而得到表達多肽疫苗的轉基因植物。隨著抗體基因工程能將抗體基因(從小的活性單位到完整抗體的重、輕鏈基因)從單抗雜交瘤中分離出來,人們就開始想辦法利用轉基因植物來表達這些抗體。

  1989年Hiatt將鼠雜交瘤細胞產生的抗體基因轉入煙草細胞獲得了植物抗體,并且發(fā)現植物抗體具有雜交瘤來源抗體同樣的抗原結合能力,既有功能性。在這之后,全長抗體、單域抗體和單鏈抗體在轉基因植物中均獲得成功表達。用植物抗體進行局部免疫治療將是一個引人矚目的領域,應用高親和性抗體進行局部治療可以治愈齲齒及其它一些常見病。植物轉基因可獲得更多的新品種,蔬菜,水果,花卉都能夠在保留其優(yōu)良品質的情況下優(yōu)化。

  動物

  人工轉基因動物就是基因組中含有外源基因的動物。它是按照預先的設計,融合重組細胞、遺傳物質轉移、染色體工程和基因工程技術將外源基因導入精子、卵細胞或受精卵,再以生殖工程技術,有可能育成轉基因動物。

  通過生長素基因、多產基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉精基因、角蛋白基因、抗寄生蟲基因、抗病毒基因等基因轉移,可能育成優(yōu)良的可養(yǎng)殖品種。

  基因動物是指用實驗導入的方法將外源基因在染色體基因內穩(wěn)定整合并能穩(wěn)定表達的一類動物。1974年,Jaenisch應用顯微注射法,在世界上首次成功地獲得了SV40DNA轉基因小鼠。其后,Costantini將兔-珠蛋白基因注入小鼠的受精卵,使受精卵發(fā)育成小鼠,表達出了兔β-珠蛋白;Palmiter等把大鼠的生長激素基因導人小鼠受精卵內,獲得“超級”小鼠;Church獲得了首例轉基因牛。到目前為止,人們已經成功地獲得了轉基因鼠、雞、山羊、豬、綿羊、牛、蛙以及多種轉基因魚。

  還可將轉基因動物作為生物工廠(Biofactories),包括,乳腺生物反應器和輸卵管生物反應器等,如以轉基因小鼠生產凝血因子IX、組織型血纖維溶酶原激活因子(t-PA)、白細胞介素2、α1-抗胰蛋白酶,以轉基因綿羊生產人的α1-抗胰蛋白酶,以轉基因山羊、奶牛生產LAt-PA,以轉基因豬生產人血紅蛋白等,這些基因產品具有高效、優(yōu)質、廉價與相應的人體蛋白具有同樣的生物活性,且多隨乳汁分泌,便于分離純化,基于系統(tǒng)生物學的發(fā)展,轉基因系統(tǒng)生物技術-合成生物學成為不僅單基因而且多基因乃至基因組設計、合成與轉基因的新一代生物技術。

  但由于人工轉基因動物,它們受遺傳鑲嵌性和雜合性的影響,其有性生殖后代變異較大,難以形成穩(wěn)定遺傳的轉基因品系。因而,嘗試從受體動物細胞中分離出線粒體,以外源基因對其進行離體轉化,再將人工轉基因線粒體導入受精卵,所發(fā)育成的人工轉基因動物,雌性個體外培養(yǎng)的卵細胞與任一雄性個體交配或體外人工受精,由于線粒體的細胞質遺傳,其有性后代可能全都是人工轉基因個體。
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