什么是外周血_相關(guān)介紹

時(shí)間：2016-09-14 09:03:16 謝君787由分享

什么是外周血_相關(guān)介紹

　　正常人外周血中一般看不見幼稚的干細(xì)胞的，只存在有極少量的造血干細(xì)胞，那么你對(duì)外周血了解多少呢?以下是由學(xué)習(xí)啦小編整理關(guān)于什么是外周血的內(nèi)容，希望大家喜歡!

　　什么是外周血

　　外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中首次提出外周血這一新概念。

　　正常人外周血中一般看不見幼稚的干細(xì)胞的，只存在有極少量的造血干細(xì)胞，其含量為0.01%左右。如果幼稚細(xì)胞的比例大幅增加，有可能是類白血病。正因?yàn)榇嬖?.01%的造血干細(xì)胞，可利用細(xì)胞分離的技術(shù)(血細(xì)胞自動(dòng)分離機(jī))，將外周血中含有造血干細(xì)胞的單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行分離保存，重復(fù)數(shù)次達(dá)一定細(xì)胞數(shù)量后，回輸給患者以之代替骨髓而進(jìn)行的干細(xì)胞移植，稱為外周血干細(xì)胞移植。

　　培養(yǎng)基配制外周血

　　配制用水

　　培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的

　　雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

　　培養(yǎng)基

　　培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2～7.4，若pH值超

　　過7.6或遠(yuǎn)低于6.8，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。

　　血清

　　培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。

　　抗菌素

　　為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染，可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)抗菌素，一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/

　　毫升，鏈霉素100微克/毫升。

　　植物血凝素(PHA)

　　非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細(xì)胞，但在離體培養(yǎng)過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。

　　經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44—48小時(shí)和68—72小時(shí)。

　　PHA有粘多糖，蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA激活的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細(xì)胞均

　　被激活為止，但PHA濃度過高會(huì)引起凝集，一般采用4%濃度為好。
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