栽培北蟲草的技術(shù)要點(diǎn)

　　蛹蟲草(Cordyceps militaris)又名北冬蟲夏草、北蟲草等，是由子座(即草部分)與菌核(即蟲的尸體部分)兩部分組成的復(fù)合體。那么下面一起來(lái)看看學(xué)習(xí)啦小編為大家精心推薦的北蟲草的種植技術(shù)，希望能夠?qū)δ兴鶐椭?/p>

　　北蟲草的種植技術(shù)

　　蛹蟲草是一種子囊菌，通過(guò)異宗配合進(jìn)行有性生殖;水分是蛹蟲草菌體細(xì)胞的重要組成部分。藥理作用現(xiàn)代科學(xué)論證科茸蛹蟲草不僅具有特殊的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，而且有明顯的藥用價(jià)值。中醫(yī)認(rèn)為，蟲草入肺腎二經(jīng)，既能補(bǔ)肺陰，又能補(bǔ)腎陽(yáng)、主治腎虛、陽(yáng)痿遺精、腰膝酸痛、病后虛弱、久咳虛弱、勞咳痰血、自汗盜汗等，是唯一的一種能同時(shí)平衡、調(diào)節(jié)陰陽(yáng)的中藥。

　　北蟲草的區(qū)別

　　(1)形狀不同。天然蟲草是冬蟲夏草的蟲體或蛹體與蟲草菌的子實(shí)體(草的部分)合二為一體的整體，而人工培植北冬蟲夏草僅僅是北冬蟲夏草菌的子實(shí)體，在外觀上與天然冬蟲夏草有很大區(qū)別。由于人工培植北冬蟲夏草與天然冬蟲夏草的形狀不同，外觀不一樣，影響了市場(chǎng)與消費(fèi)者對(duì)人工培植的北冬蟲夏草消費(fèi)購(gòu)買欲望。

　　(2)營(yíng)養(yǎng)載體不同。天然冬蟲夏草以自然蟲體或蛹體營(yíng)養(yǎng)為基礎(chǔ)，具有醫(yī)藥療效的冬蟲夏草產(chǎn)地是西藏那曲和青海玉樹兩個(gè)產(chǎn)地的蟲草，福臨門冬蟲夏草和同仁堂是這兩個(gè)產(chǎn)地的代表品牌，其中以同仁堂價(jià)格最高。人工培植的北冬蟲夏草以人工營(yíng)養(yǎng)為基礎(chǔ)。其實(shí)，營(yíng)養(yǎng)載體不同不影響蟲草菌的最終物質(zhì)的形成。比如，人能夠吃動(dòng)物性食物，也能夠吃植物性食物，而兩者食物偏向并不影響人體的生長(zhǎng)和人體質(zhì)量。這是因?yàn)?，不管什么食物都必須通過(guò)人體分解成可吸收的小分子成分，才可以被人體吸收。同樣如此，不管蟲草菌長(zhǎng)在什么營(yíng)養(yǎng)栽培體上，也必須通過(guò)蟲草菌的分解，才能成為蟲草菌生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源并生成官子實(shí)體。其關(guān)鍵是人工提供的營(yíng)養(yǎng)成分、比例、形態(tài)和吸收條件是否符合蟲草菌良好生長(zhǎng)的需要。

　　(3)生長(zhǎng)環(huán)境不同。天然蟲草菌生長(zhǎng)在自然環(huán)境中，這種自然環(huán)境是特定的，不是隨心所欲的。人工培植的北冬蟲夏草生長(zhǎng)在人為的環(huán)境中，這種人為環(huán)境是根據(jù)蟲草生長(zhǎng)的特定自然環(huán)境而設(shè)定，不過(guò)比自然環(huán)境更優(yōu)裕，從而使蟲草菌生長(zhǎng)得更好、產(chǎn)量更高。

　　(4)生產(chǎn)周期不同。由于受惡劣自然環(huán)境影響，天然冬蟲夏草在自然環(huán)境中生長(zhǎng)周期為2～3年，主要是寄生體(蟲體)世代繁殖生育期較長(zhǎng)以及蟲草菌受惡劣自然環(huán)境影響生長(zhǎng)緩慢。人工培植的北冬蟲夏草菌在優(yōu)裕的生長(zhǎng)環(huán)境中生產(chǎn)，即人工控制最適宜生長(zhǎng)條件以及在穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境中不受自然環(huán)境的影響，2個(gè)月內(nèi)就可以生產(chǎn)一批，大大提高了生產(chǎn)效率。

　　(5)對(duì)環(huán)境影響不同。天然冬蟲夏草菌在自然環(huán)境中生長(zhǎng)非常緩慢，跟不上市場(chǎng)與人們需求的需要。人們大量采挖天然冬蟲夏草，破壞了自然植被，也破壞了自然環(huán)境和資源。人工培植的北冬蟲夏草，在室內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)，沒(méi)有任何破壞自然植被、自然環(huán)境和資源的行為。而且，在生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有任何產(chǎn)物會(huì)污染環(huán)境。

　　(6)人工培植的北冬蟲夏草比天然生長(zhǎng)的冬蟲夏草有效成分更高。野生蟲草和人工蟲草在化學(xué)成分上是完全一致的，只是含量上有所差異。人工培植的北冬蟲夏草(蛹蟲草)大多超過(guò)天然生長(zhǎng)的冬蟲夏草。經(jīng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)分析證明，冬蟲夏草對(duì)人體健康的意義是其含有特有的藥用和保健作用的物質(zhì)：蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖和豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素、維生素等。經(jīng)中國(guó)科學(xué)院理化分析測(cè)試實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)報(bào)道，具有蟲草代表性的4種主要藥理成分：蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖和SOD酶，人工北蟲草與野生冬蟲夏草相比，除了蟲草酸略低于野生蟲草外，其余均明顯高于野生蟲草。蟲草多糖高2倍，SOD酶高5倍，蟲草素高達(dá)89倍。尤其在眾多蟲草屬中，能產(chǎn)生最具特有代表性成分的蟲草素，人工北蟲草是唯一能產(chǎn)生大量蟲草素的品種。人工蛹蟲草里蟲草素的含量大概是野生蟲草的10倍左右?！　∠x草中腺苷成分含量不能代表蟲草特有的藥用和保健價(jià)值，其原因是腺苷在香菇、蘑菇等幾十類真菌植物中都有存在。因此，把腺苷作為唯一質(zhì)量指標(biāo)是“貶低”了蟲草的特有價(jià)值，不能體現(xiàn)蟲草防病治病的特有奧秘。

　　北蟲草的栽培條件

　　營(yíng)養(yǎng)

　　碳源

　　蛹蟲草使用方法

　　碳源是蛹蟲草合成碳水化合物和氨基酸的基礎(chǔ)，也是重要的能量來(lái)源。人工栽培時(shí)，蛹蟲草可利用的碳源有葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、淀粉、果膠等，其中尤以葡萄糖、蔗糖等小分子糖類的利用效果最好。

　　氮源：氮元素是蛹蟲草自身合成的蛋白質(zhì)、核酸等有機(jī)氮以及銨鹽等無(wú)機(jī)氮。能利用的有機(jī)氮很多，如氨基酸、蛋白胨、豆餅粉、蠶蛹粉等;無(wú)機(jī)氮主要有氯化銨、硝酸鈉、磷酸氫二銨等。有機(jī)氮的利用效果最好。

　　礦質(zhì)元素：以磷、鉀、鈣、鎂等為主要元素。一般通過(guò)添加無(wú)機(jī)鹽類來(lái)滿足蛹蟲草對(duì)礦質(zhì)元素的需求。

　　維生素：蟲草菌絲不能合成必要的維生素，適當(dāng)加入VB1有利于菌絲的生長(zhǎng)發(fā)育。

　　溫度

　　在蟲草的不同生長(zhǎng)發(fā)育階段都有最適溫度、最低溫度和最高溫度的界限。菌絲生長(zhǎng)溫度6℃—30℃，低于6℃極少生長(zhǎng)，高于30℃停止生長(zhǎng)，甚至死亡。最適生長(zhǎng)溫度為18℃—22℃;子實(shí)體生長(zhǎng)溫度為10℃—25℃，最適生產(chǎn)溫度為20℃—23℃。原基分化時(shí)需較大溫差刺激，一般應(yīng)保持5℃—10℃溫差。

　　水分和濕度

　　水分是蛹蟲草菌體細(xì)胞的重要組成部分。菌絲生長(zhǎng)階段，培養(yǎng)基含水量保持在60%—65%，空氣相對(duì)濕度保持在60%—70%;子實(shí)體生長(zhǎng)階段，培養(yǎng)基含水量要達(dá)到65%—70%，空氣相對(duì)濕度保持在80%—90%。要注意培養(yǎng)基適時(shí)補(bǔ)水和補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)液。

　　空氣

　　蛹蟲草需要少量空氣。但在子實(shí)體發(fā)生期要適當(dāng)通風(fēng)，增加新鮮空氣。否則，二氧化碳積累過(guò)多，子座不能正常分化，影響生長(zhǎng)發(fā)育。

　　光照

　　孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)階段不需要光照，應(yīng)保持黑暗環(huán)境。但轉(zhuǎn)化到生殖生長(zhǎng)階段需要明亮的散射光，光照度為100—240勒(勒為光照度單位)。光照強(qiáng)，菌絲色澤深，質(zhì)量好，產(chǎn)量高。

　　酸堿度

　　蛹蟲草

　　蛹蟲草為偏酸性真菌，其菌絲生長(zhǎng)發(fā)育最適pH為5.2—6.8。但在滅菌和培養(yǎng)過(guò)程中pH值要下降。所以在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)調(diào)高pH值1—1.5，在配制培養(yǎng)基時(shí)可加0.1%—0.2%的磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀等緩沖物質(zhì)。

　　育種

　　長(zhǎng)期采用無(wú)性繁殖及多次轉(zhuǎn)管的蛹蟲草菌種，其母本基因容易變異，表現(xiàn)為出草畸形，產(chǎn)質(zhì)量下降。因此，在生產(chǎn)中應(yīng)定期對(duì)蛹蟲草菌種進(jìn)行一次有性繁殖。具體做法是，選取高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、早熟的蛹蟲草子實(shí)體，用0.1%升汞溶液，或75%的酒精進(jìn)行表面消毒后，用無(wú)菌水清洗表面藥液，置于盛有綜合培養(yǎng)基容器上方懸空，在21℃-23℃下靜置培養(yǎng)，待培養(yǎng)基表面出現(xiàn)星芒狀蟲草菌落時(shí)，在接種箱內(nèi)挑取單個(gè)或多個(gè)菌落置試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)。待蛹蟲草菌絲布滿斜面后再提純。獲得的孢子母種須經(jīng)出草比較試驗(yàn)后，選取優(yōu)質(zhì)蟲草子實(shí)體再進(jìn)行一次組織分離，經(jīng)篩選后方可用于轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種。

　　考種

　　將母種擴(kuò)大培養(yǎng)后，置米飯培養(yǎng)基上，于18℃-20℃下培養(yǎng)20-30d，觀察生長(zhǎng)情況。若見有細(xì)菌或霉菌污染，應(yīng)對(duì)母種進(jìn)一步純化;若無(wú)雜菌污染，可繼續(xù)培養(yǎng)，一個(gè)月后即有橙紅色子實(shí)體產(chǎn)生，說(shuō)明母種可靠。

　　二級(jí)種子培養(yǎng)

　　將液體培養(yǎng)基分裝于500ml三角瓶中，每瓶加培養(yǎng)液200ml，用12層紗布外加一層牛皮紙封口。13-30分鐘滅菌后，將母種在無(wú)菌條件下用接種鉤接入三角瓶中，每支斜面可接10瓶以上。接種后于20℃搖床培養(yǎng)5d左右，待形成均勻小球后即可用于栽培種。

　　值得注意的是：如果培養(yǎng)液變混，有兩種可能性，一是細(xì)菌污染應(yīng)予以淘汰;二是由于菌絲生長(zhǎng)過(guò)分粘稠所致。若難以判斷，可進(jìn)行鏡檢。

　　栽培流程

　　優(yōu)選品種→制備培養(yǎng)基→蛹蟲草母種→二級(jí)菌種(藥瓶)→栽培蛹蟲草菌種→控制環(huán)境溫度與濕度→采收。

　　北蟲草的菌種分離

　　(1)選革選擇生長(zhǎng)正常、健壯、無(wú)病蟲害的新鮮蛹蟲草做分離材料。用野生早期生長(zhǎng)(8月底以前出土的)蛹蟲草分離得到的蛹蟲草菌種具有明顯早熟性(即早出草)。菌種分離可采用泡子分離或組織分離等方法，生產(chǎn)上常用組織分離獲得純菌種或進(jìn)行菌種復(fù)壯。

　　(2)消毒將鮮蛹蟲草用清水洗去外表泥土，再用0.1%升汞水溶液消毒l～3分鐘，用無(wú)菌水沖洗數(shù)次，然后再用75%酒精浸泡3～5分鐘，用無(wú)菌水洗凈后進(jìn)行分離。

　　(3)分離先用解剖刀切去蟲體外部，避開腸道，然后切取內(nèi)部白色組織塊或子座內(nèi)的組織塊，接種到斜面母種培養(yǎng)基上。以蛹蟲草子實(shí)體有龜背狀花紋的頂端組織獲得菌種種性最好。

　　(4)選擇抑菌培養(yǎng)基分離培養(yǎng)基最好采用加有50毫克/升鏈霉素的加富培養(yǎng)基。如采用其他培養(yǎng)基進(jìn)行分離，在培養(yǎng)基中加入一定量的抑菌劑會(huì)提高分離效果。常用抑菌劑使用量和加入方法如下：鏈霉素 30～50毫克/升，滅菌后冷卻至 45℃時(shí)加入;金霉素 20～30毫克/升，滅菌后冷卻至 45℃時(shí)加入;青霉素 20毫克/升，滅菌后冷卻至 45℃時(shí)加入;牛膽汁 5克/升，配制時(shí)加入;孟加拉紅 35毫克/升，培養(yǎng)基煮沸時(shí)加入。

　　(5)培養(yǎng)分離接種后，在 20℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng) 10天左右，挑選性狀良好的母種作為菌種。

　　(6)鑒定優(yōu)良菌種標(biāo)準(zhǔn)是：菌絲白色，粗壯濃密，呈匍匐狀緊貼培養(yǎng)基生長(zhǎng)，邊緣整齊，無(wú)明顯絨毛狀白色氣生菌絲，后期分泌黃色色素，菌絲見光后變?yōu)殚冱S色。將分離菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，接種在米飯培養(yǎng)基上進(jìn)行出草和鑒定。于18℃～20℃溫度下培養(yǎng)20～30天，如果無(wú)污染則繼續(xù)培養(yǎng)，l個(gè)月后即可形成橙紅色子實(shí)體。經(jīng)鑒定種性，選擇性狀優(yōu)良菌種用于生產(chǎn)。

　　培養(yǎng)基

　　以大米、玉米等作主料，另添加10%-25%的蠶蛹粉或奶粉媽提高蛹蟲草子實(shí)體的品質(zhì)。將培養(yǎng)料與營(yíng)養(yǎng)液以1：1比例拌勻，pH值掌握在5.5-7.0。按常規(guī)裝瓶、滅菌、接種。

　　菌絲體培養(yǎng)

　　接種后的料瓶，應(yīng)置于清潔、避光的環(huán)境中培養(yǎng)，保護(hù)空氣濕度60%。初始階段，為減少雜菌污染，室內(nèi)溫室宜保持在15℃-18℃之間，待料面布滿蟲草菌絲后，將溫度提到20℃-23℃，持續(xù)15d左右，菌絲即可吃透培養(yǎng)料，完成營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)。

　　北蟲草的新興培植

　　上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)生鄔口關(guān)博以一套獨(dú)特的冬蟲夏草培育方法，獲得主辦方特設(shè)的“科技創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目獎(jiǎng)”。這位大學(xué)女生將把這項(xiàng)發(fā)明付諸商業(yè)實(shí)踐。小鄔的參賽項(xiàng)目名叫“名貴中藥仿太古環(huán)境培育技術(shù)研究”。她告訴記者，該項(xiàng)目的創(chuàng)意來(lái)自于某次看雜志時(shí)，發(fā)現(xiàn)在漫長(zhǎng)的地質(zhì)年代里，有一些特定時(shí)期的氣候條件非常適宜于植物生長(zhǎng)。小鄔猜測(cè)，如果將一些名貴中藥放在類似的環(huán)境中，是不是也能長(zhǎng)得又快又好呢?于是，她設(shè)計(jì)了一個(gè)“蟲草暖箱”，里面安裝空氣調(diào)節(jié)裝置，可以按需要調(diào)節(jié)箱內(nèi)溫度、濕度和大氣壓等參數(shù)，從而制造一個(gè)人工的“大氣圈”。小鄔說(shuō)，針對(duì)不同培育品種設(shè)置不同參數(shù)。相關(guān)技術(shù)已申請(qǐng)多項(xiàng)發(fā)明專利，已進(jìn)入實(shí)審階段。在學(xué)校的實(shí)驗(yàn)室里，小鄔和同伴們已經(jīng)做成一個(gè)冰柜大小的試驗(yàn)品，并且成功培育了幾批蛹蟲草。蛹蟲草是一種人工培育的冬蟲夏草的替代品，不僅價(jià)格相對(duì)低廉，所含的富有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的蟲草素也是野生冬蟲夏草中的16倍左右，已證實(shí)對(duì)淋巴癌和部分白血病有積極的治療作用，應(yīng)用前景非常廣泛。“一樣的菌種，在我們的‘蟲草暖箱’里培育，成本可節(jié)省約50%、培育周期縮短約40%，蟲草素含量也有大幅提高，應(yīng)該挺受市場(chǎng)歡迎的。”小鄔對(duì)創(chuàng)業(yè)前景很有信心，并透露以后還將嘗試其他中草藥的培育方法。此次大賽由上海發(fā)明協(xié)會(huì)、上海市科技創(chuàng)業(yè)中心主辦，共有82個(gè)項(xiàng)目獲獎(jiǎng)，有4個(gè)項(xiàng)目獲得“科技創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目獎(jiǎng)”。

　　子實(shí)體培養(yǎng)

　　菌絲體成熟后，由白色逐漸轉(zhuǎn)為桔黃色，此時(shí)，室內(nèi)應(yīng)增加光照白，白天利用自然散射光，保持200勒克斯，晚間可利用日光燈作光源，每天應(yīng)不少于10h光照，以促使菌絲體轉(zhuǎn)色和刺激原基形成。待料面突起，并形成小米粒狀原基時(shí)，要適當(dāng)通風(fēng)，補(bǔ)充新鮮空氣，保護(hù)室內(nèi)溫度18℃-22℃，并提高空氣相對(duì)溫度至80%-85%。如濕度太大，易使培養(yǎng)基提早失水而影響產(chǎn)量。蛹蟲草有較強(qiáng)的趨光性，因此在子實(shí)體形成后，應(yīng)根據(jù)情況適當(dāng)調(diào)整培養(yǎng)瓶與光源的相對(duì)方向，或調(diào)整室內(nèi)光源方向，以保證子實(shí)體的正常生長(zhǎng)形態(tài)，從而提高產(chǎn)量，形成橘黃色或橘紅色的頂部略膨大的呈棒狀的子座(子實(shí)體)。待子實(shí)體不再生長(zhǎng)，其頂端出現(xiàn)許多小刺時(shí)，表明已成熟。采收時(shí)，用無(wú)菌鑷子鉗出子實(shí)體，然后再加少許營(yíng)養(yǎng)液，重新包扎好瓶口，繼續(xù)培養(yǎng)，20d左右，又可長(zhǎng)出第二批子座。采收下的子實(shí)體晾干或低溫烘干后出售。暫不出售，應(yīng)密封好置低溫干燥處貯存。

　　液體培養(yǎng)

　　蛹蟲草天然蛹蟲草資源稀少，人工固體栽培周期長(zhǎng)，也不易控制條件。通過(guò)液體深層培養(yǎng)法獲得蟲草菌絲體絲體的化學(xué)組成與從天然采集的蟲草的化學(xué)組成接近，而且可以從發(fā)酵液中得到人們需要的物質(zhì)，還能大大縮短生產(chǎn)周期。

　　邵愛娟等研究得出蟲草菌絲的最適生長(zhǎng)溫度為20~25°C。在進(jìn)行菌絲發(fā)酵時(shí)碳源以蛋白胨為最優(yōu)，采用1∶2或1∶3的碳氮比較為合適。

　　李宗軍等正交實(shí)驗(yàn)表明，發(fā)酵最佳培養(yǎng)基組成是：5%大米粉、1.5%豆餅粉、1.5%麥芽粉、0.1%KH2PO4，0.05%MgSO4·7H2O。

　　李信等得出影響蛹蟲草菌胞外多糖產(chǎn)量的實(shí)驗(yàn)因子顯著性大小的排列順序?yàn)椋禾鸩颂?gt;;酵母浸出粉>KNO3>MgSO4·7H2O>FeSO4>K2HPO4。胞外多糖最佳發(fā)酵工藝參數(shù)：初始pH值為7，500ml三角瓶中培養(yǎng)基裝液量為100ml，接種量6%，溫度28°C。周期為96h。

　　趙明文等得出的優(yōu)化培養(yǎng)基配方為：玉米粉4%，黃豆粉0.6%，酵母粉0.3%，K2HPO40.05%，MgSO40.05%，接種量3%，pH5.5。認(rèn)為碳源因子對(duì)胞外多糖的產(chǎn)生影響顯著。

　　陳晉安等得出蛹蟲草發(fā)酵的適宜培養(yǎng)基組成為：蔗糖5.0%，玉米漿3.0%，酵母膏0.5%，MgSO4·7H2O0.05%，KH2PO40.05%，認(rèn)為蔗糖為碳源最好，以酵母膏為氮源，菌體產(chǎn)量最高。

　　李燁研究認(rèn)為蛹蟲草菌絲的生長(zhǎng)可以利用多種碳源和氮源，在以紅糖碳源、奶粉為氮源的液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最佳，且碳源/氮源合適的比例為2.0~2.5/1.0，適宜PH為5.0~6.5。

　　汪宇等以發(fā)酵得率為指標(biāo)優(yōu)化培養(yǎng)基成分確定為蛋白胨1.5%，MgSO40.05%，KH2PO40.15%，VB15mg/L，2，4D2mg/L。在相同條件下，優(yōu)化培養(yǎng)基比原來(lái)培養(yǎng)基的發(fā)酵得率提高了4.5%，研究初步得到蛹蟲草液體培養(yǎng)條件和生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)，為工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的理論依據(jù)。

　　劉祝等研究最好的培養(yǎng)基配比可將該菌株的蟲草素含量提高到1.21%，比用Czapek培養(yǎng)基提高8.1倍。柴建萍等通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出玉米粉為最優(yōu)碳源，蠶蛹粉為最優(yōu)氮源，MgSO4為最優(yōu)無(wú)機(jī)鹽。液體發(fā)酵最佳培養(yǎng)基配方為：玉米粉(20g/1000ml)，蠶蛹粉(5g/1000ml)，硫酸鎂(0.5g/1000ml)。